發(fā)布日期：2021/08/24

 PBS緩沖液與TBS緩沖液的區(qū)別


在生化實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)用最為廣泛的緩沖液有PBS緩沖液和用Tris配制的TBS緩沖液。它們的作用都是調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的pH值，但又有各自的區(qū)別。近年來，TBS緩沖液的應(yīng)用越來越多，有超過磷酸鹽緩沖液的趨勢(shì)。

PBS是磷酸緩沖鹽溶液（phosphate buffer saline）一般作為溶劑，起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級(jí)解離，緩沖的pH值范圍很廣；而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。


Tris緩沖鹽溶液簡(jiǎn)稱TBS, 屬于常規(guī)pH緩沖液，常用于清洗免疫染色的組織或Western Blot 中的蛋白印跡膜等，是常用的分子生物學(xué)試劑。TBS緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化鈉、BSA、防腐劑等組成，可用于免疫金銀染色中清洗組織，亦可作為封閉液的基礎(chǔ)試劑。

PBS磷酸緩沖鹽溶液具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用，不僅狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋，比如稀釋血清。原因就是它蒸餾水不具有鹽平衡作用，可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性；生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用，對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng)，所以使用PBS是首選。

但是PBS緩沖液也不是萬能的，有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。

但是，在在有金屬離子的溶液體系中，磷酸體系會(huì)與常見的Ca離子、Mg離子以及重金屬離子締合生成沉淀。在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中已都使用Tris緩沖液，而很少再用磷酸鹽。
 

TBS是Tris-HCl緩沖鹽溶液（Tris Buffered,Saline）或緩沖生理鹽水。配制方法是：先以重蒸水少許溶解NaCl（3.5～9g，0.15mol/L），再加0.5mol/L Tris-HCl緩沖液100mL，最后加重蒸水至1000ml，充分搖勻使Tris終濃度為0.05mol/L。TBS常用于免疫酶技術(shù)中漂洗標(biāo)本，通常還搭配去污劑Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚，一種非離子型表面活性劑）一起使用。

 

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